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[材料、試劑與儀器]
1、實(shí)驗(yàn)材料:
Hela細(xì)胞系。
2、實(shí)驗(yàn)試劑:
DMEM培養(yǎng)基(青霉素，鏈霉素，10%血清) ，0.25%胰蛋白酶溶液， 臺(tái)酚藍(lán)染液。
3、實(shí)驗(yàn)儀器:
超凈工作臺(tái)，CO2培養(yǎng)箱，倒置顯微鏡，微量移液器，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，培養(yǎng)瓶，離心管,移液管，廢液缸，蓋玻片, 24孔板。
[方法與步驟]
1、取生長(zhǎng)良好的細(xì)胞，用培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液后計(jì)數(shù)。根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果按5x104/mL作傳代培養(yǎng)接種于24孔板中，共接種21孔細(xì)胞。1 m/孔。余下三孔可設(shè)傳代培養(yǎng)的對(duì)照。
2、24h后每天記錄細(xì)胞數(shù)目，每次取3孔細(xì)胞，分別進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)7d。細(xì)胞用胰酶消化后加入一定量的培養(yǎng)基,混勻制成細(xì)胞懸液。取少量懸液與臺(tái)酚藍(lán)1:1混臺(tái)。取一干凈的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,蓋上蓋片，從蓋片兩邊滴入細(xì)胞懸液使之充滿計(jì)數(shù)板和蓋片之間