提供商: 上海研謹生物
服務(wù)名稱: 流式細胞分選技術(shù)實驗服務(wù)
規(guī)格: 樣本
價格:30元
周期:2周左右
收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談
,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議
。
更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
流式細胞分選技術(shù)實驗服務(wù)
一.服務(wù)介紹
流式細胞分選技術(shù)是利用流式細胞分選儀。以高能量激光照射高速流動狀態(tài)下被熒光色素染色的單細胞或微粒
,測量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強度
,從而對細胞(或微粒)的物理、生理
、生化
、免疫、遺傳
、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進行定性或定量檢測的一種現(xiàn)代細胞分析技術(shù)
,它可根據(jù)發(fā)射光的熒光強度和波長將發(fā)光顆粒亞群分開并可實現(xiàn)單克隆分選,能復(fù)雜樣本中的細胞進行鑒定
、分類.定量和分離
,單次可同時對其中-種到四種特定細胞進行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備
。分選后的細胞能直接用于培養(yǎng)
、移植、核酸提取
、單細胞PCR擴增或原位雜交等
,可進一步進行細胞基因、蛋白
、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究
。硬件中樣本細胞丟棄的比例低于5%,保證樣本中目標細胞的高回收率
。
二、實驗原理
當(dāng)經(jīng)熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動室內(nèi)
。流動室內(nèi)充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動下
,細胞被排成單列,以-定速度從流動室噴口噴出
。在流動室的噴口上配有一個超高頻的壓電晶體
, 充電后振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴
,待測細胞就分散在這些液滴之中
。將這些液滴充以正
、負不同的電荷,當(dāng)液滴流經(jīng)過帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時
,在高壓電場的作用下偏轉(zhuǎn)
,落入各自的收集容器中,沒有充電的液滴落入中間的廢液容器
,從而實現(xiàn)細胞的分離
。
三、實驗流程(以分選有核紅細胞為例)
1采抗凝血10 ml
。
2.密度梯度分離單個核細胞層
(1)在短中管中加入適量淋巴細胞分離液
。
(2)取肝素抗凝靜脈血與等量Hank's液或RPM11640充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,注意保持清楚的界面
。水平離心2000 rpmx20分鐘
。
(3)離心后管內(nèi)分為三層
,上層為血漿和Hank's液
, 下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為淋巴細胞分離液
,在上
、中層界面處有一-以單個核細胞為主的白色云層狹窄帶,單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞
。此外
, 還含有血小板。
(4)用毛細血管插到云霧層
,吸取單個核細胞
。置入另-短中管中,加入5倍以上體積的Hank's液或RPMI1640, 1500rpmx10分鐘,洗滌細胞兩次
。
3.免疫熒光染色
將上一步得到的單個核細胞層按1x10/1的比例加入異硫青酸(FITC)標記的CD71單克隆抗體(鼠IgM).孵育30 min后重懸于0.5 ml PBS液中進行熒光染色
。
4.FACS分選CD71陽性細胞。
四、服務(wù)說明
1.客戶提供血液樣本
。
2.公司提供圖片和分離后的細胞。
3.實驗周期為2周左右
,具體根據(jù)實驗內(nèi)容而定
。
五、質(zhì)量承諾
提供清晰的圖片和分選后的細胞
。
從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域
、生物醫(yī)學(xué)實驗外包及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色
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