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產(chǎn)品類別：紅細(xì)胞的分離
 
產(chǎn)品編號(hào)：RBC2012YK
 
產(chǎn)品名稱：鴨紅細(xì)胞分離液試劑盒
 
產(chǎn)品規(guī)格：200ml/KIT
 
產(chǎn)品價(jià)格：￥800.00元
 
本品用于分離鴨紅細(xì)胞



“XXXX”動(dòng)物外周血紅細(xì)胞分離液實(shí)驗(yàn)方法
 
技術(shù)文檔編號(hào)：TBD0047SOP
 
【產(chǎn)品規(guī)格】
 
200ml/Kit
 
【產(chǎn)品組成】
 
為方便廣大用戶使用，試劑內(nèi)容如下：
 

	名稱	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格
A	XXXX 動(dòng)物外周血紅細(xì)胞分離液		200ml
B	樣本稀釋液（贈(zèng)品）	2010C1119	200ml
C	清洗液（贈(zèng)品）	2010X1118	200ml
D	說(shuō)明書		1 份

 
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
 
適用儀器:最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
 
【檢驗(yàn)方法】
 
全過(guò)程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
 
首先取抗凝血按體積比 1:1 的比例加樣本稀釋液（產(chǎn)品編號(hào)：2010C1119）混勻，根據(jù)
 
稀釋后的樣本量大小，分以下兩種情況：
 
情況 A：稀釋后的血液樣本量小于 5ml 時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法如下：
 

• 取一支 15ml 離心管
  ，先加入與稀釋后樣本等量的分離液（注：分離液最少不得少于 3ml）
  。

 

• 用吸管小心吸取稀釋后的血液樣本加于分離液液面上，600-900g
  ，離心 25-30min（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件
  ，血液樣本量越多，離心力越大
  ，離心時(shí)間越長(zhǎng)

  ，具體離心條件需客戶自行摸索，以達(dá)到最佳分離效果）

  。

 

• 離心后
  ，此時(shí)離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層

  。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層

  。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層

  。

 

• 用吸管小心吸取第一
  、二、三層

  ，棄去

  ，在剩余紅細(xì)胞層中加入 10ml 清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118），混勻細(xì)胞

  。
• 250g
  ，離心 10min。

 

• 棄上清
  。

 

• 用吸管以 5ml 清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118）重懸所得細(xì)胞
  。

• 250g，離心 10min
  。

 

• 重復(fù) 6
  、7、8

  ，棄上清后以 0.5ml 后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞

  。

 
情況 B：稀釋后的血液樣本量大于等于 5ml 時(shí)

，實(shí)驗(yàn)方法如下：
 

• 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管，先加入與稀釋后樣本等量的分離液
  。

 

• 將經(jīng)稀釋后的血液樣本小心加于分離液之液面上
  ，650-950g（最大離心力可至 1000g）
  ，離心 25-30min
  。（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液量越多
  ，離心力越大
  ，離心時(shí)間越長(zhǎng)，具體離心條件需客戶自行摸索
  ，以達(dá)到最佳分離效果
  。加入血液樣本后，樣本及分離液總體積不得超過(guò)離心管總體積的三分之二）
  。

 

• 剩余步驟同“情況 A”中步驟 3 至步驟 10
  。

 
【注意事項(xiàng)】
 

• 全過(guò)程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行
  。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
  ，最好在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液存放時(shí)間越長(zhǎng)
  ，細(xì)胞分離效果越差
  。血液放置超過(guò) 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。

 

• 本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品
  ，應(yīng)使用無(wú)靜電
  、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過(guò)后的玻璃制品，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁
  、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面
  ，影響細(xì)胞分離效果。
• 如第一二三層吸不干凈
  ，會(huì)導(dǎo)致粒細(xì)胞等混雜
  。

 

• 如所實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過(guò)低，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助
  。

 
【儲(chǔ)存條件及有效期】
 
常溫保存  

• 流式細(xì)胞技術(shù)
  。

 

• 免疫組化技術(shù)
  。

 
 
【可能存在的問(wèn)題及解決方法】
 

• 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度
  、大氣壓等密切相關(guān)
  。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)
  ，恒定離心時(shí)間
  ，對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。

 

• 本分離液依照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)
  ，全部使用藥用級(jí)原料
  ，性能指標(biāo)與國(guó)產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可

 
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
 
注：在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù)，直至達(dá)到最佳分離效果，
 
離心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。