中文名稱:兔紅細胞分離液試劑盒
中文別名:兔紅細胞分離液試劑盒
產(chǎn)品類別:紅細胞的分離
產(chǎn)品編號:RBCH2012RK
產(chǎn)品名稱:兔紅細胞分離液試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:200ml/KIT
產(chǎn)品價格:¥500.00元
本品用于分離兔紅細胞
“XXXX”動物外周血紅細胞分離液實驗方法
技術文檔編號:TBD0047SOP
【產(chǎn)品規(guī)格】
200ml/Kit
【產(chǎn)品組成】
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
|
名稱 |
產(chǎn)品編號 |
規(guī)格 |
|
|
|
|
A |
XXXX 動物外周血紅細胞分離液 |
|
200ml |
|
|
|
|
B |
樣本稀釋液(贈品) |
2010C1119 |
200ml |
|
|
|
|
C |
清洗液(贈品) |
2010X1118 |
200ml |
D |
說明書 |
|
1 份 |
|
|
|
|
【實驗前準備】
適用儀器:最大離心力可達 1200g 的水平轉子離心機
【檢驗方法】
全過程樣本
、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行
。
首先取抗凝血按體積比 1:1 的比例加樣本稀釋液(產(chǎn)品編號:2010C1119)混勻,根據(jù)
稀釋后的樣本量大小
,分以下兩種情況:
情況 A:稀釋后的血液樣本量小于 5ml 時,實驗方法如下:
- 取一支 15ml 離心管,先加入與稀釋后樣本等量的分離液(注:分離液最少不得少于 3ml)
。
- 用吸管小心吸取稀釋后的血液樣本加于分離液液面上
,600-900g,離心 25-30min(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件
,血液樣本量越多
,離心力越大,離心時間越長
,具體離心條件需客戶自行摸索
,以達到最佳分離效果)。
- 離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。
- 用吸管小心吸取第一、二、三層,棄去,在剩余紅細胞層中加入 10ml 清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118),混勻細胞。
- 250g,離心 10min。
- 用吸管以 5ml 清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118)重懸所得細胞。
- 250g
,離心 10min
。
- 重復 6、7
、8
,棄上清后以 0.5ml 后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。
情況 B:稀釋后的血液樣本量大于等于 5ml 時 ,實驗方法如下:
- 取一支適當?shù)碾x心管
,先加入與稀釋后樣本等量的分離液。
- 將經(jīng)稀釋后的血液樣本小心加于分離液之液面上
,650-950g(最大離心力可至 1000g)
,離心 25-30min。(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件
,血液量越多
,離心力越大,離心時間越長
,具體離心條件需客戶自行摸索
,以達到最佳分離效果。加入血液樣本后
,樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二)
。
【注意事項】
- 全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結果,最好在取血 2h 內(nèi)進行實驗,血液存放時間越長,細胞分離效果越差。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。
- 本實驗最好不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。
- 如第一二三層吸不干凈,會導致粒細胞等混雜。
- 如所實驗后細胞得率或活性過低,請聯(lián)系技術支持以尋求幫助。
【儲存條件及有效期】
常溫保存,有效期 2 年
。本品易感染細菌
,需無菌條件操作。無菌條件下操作
,啟
封后置常溫保存
。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結晶
,影響分離效果
。
【參考值(參考范圍)】
本實驗紅細胞提取率及純度均大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例
,用戶可適當進行參考
。
|
紅細胞 |
|
白細胞 |
|
血小板 |
|
|
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|
|
|
|
|
(4.0-10.0)×109 |
|
含量(個/L) |
(4.0-5.5)×1012 |
中性粒細胞 |
淋巴細胞 |
單核細胞 |
(1.0-3.0)×1011 |
|
|
50%-70% |
20%-40% |
3%-8% |
|
|
|
|
|
|
|
【相關實驗技術方案】
【可能存在的問題及解決方法】
- 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心
,其密度與溫度、大氣壓等密切相關
。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當?shù)厍闆r對離心條件進行適當調(diào)整
。建議對離心條件進行調(diào)整時,恒定離心時間
,對離心轉速進行調(diào)整
。
- 本分離液依照國際標準,全部使用藥用級原料,性能指標與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同,可
能出現(xiàn)紅細胞沉降不完全的情況,可以適當加大離心轉速
。
注:在對離心條件進行調(diào)整時
,離心轉速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達到最佳分離效果
,
離心力最小不得小于 400g
,最大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準
。
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