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中文名稱(chēng)：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)
中文別名：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)

產(chǎn)品類(lèi)別：造血干細(xì)胞的分離

產(chǎn)品編號(hào)：LGS1068CB05

產(chǎn)品名稱(chēng)：人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT醫(yī)用級(jí)

產(chǎn)品規(guī)格：200ml/KIT

產(chǎn)品價(jià)格：￥1800.00元

人臍帶血干細(xì)胞分離液KIT說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】

臍帶血收集采用自然放血且從產(chǎn)房采集到細(xì)胞分離時(shí)長(zhǎng)一般大于 2 小時(shí)

，與外周血靜脈采血且及時(shí)分離相比會(huì)影響分離效果

，為此，灝洋優(yōu)化配方以提高臍帶血干細(xì)胞分離得率

，請(qǐng)廣大醫(yī)療及科研用戶(hù)使用并提出寶貴意見(jiàn)。

【包裝規(guī)格】

	名稱(chēng)	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格

A	人臍帶血干細(xì)胞分離液	LGS1068CB-200	200ml

B	紅細(xì)胞沉降液（贈(zèng)品）	HES-TBD550	200ml

C	清洗液（贈(zèng)品）	2010X1118-100	200ml

D	說(shuō)明書(shū)		1 份

【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】

適用儀器：最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)

【檢驗(yàn)方法】

全過(guò)程樣本

、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。

方法一：

新鮮抗凝臍血與生理鹽水及紅細(xì)胞沉降液（6%羥乙基淀粉）按 1：1：1 的比例混合
，自然沉降 30min（具體沉降時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同樣本對(duì)應(yīng)調(diào)整以保證沉降效果）
。
沉降后取上層液體，300g 離心 15min
，棄去 50%上清，以剩余 50%上清重懸沉淀
，制成細(xì)胞懸液
。

取 50mLPBMC 高效離心管
，加入 15ml 分離液
，200g 離心 1min 將分離液全部離心至隔片以下，傾去隔片上殘留的分離液
。

將細(xì)胞懸液加至隔片上，400-500g
，離心 20-30min
。

離心后取白色環(huán)狀目的細(xì)胞層，清洗后重懸備用
。

方法二：

新鮮抗凝臍血與紅細(xì)胞沉降液（6%羥乙基淀粉）按 1：1 的比例混合。

取 50mLPBMC 高效離心管
，加入 15ml 分離液
，200g 離心 1min 將分離液全部離心至隔片以下，傾去隔片上殘留的分離液
。

將與沉降液混勻的樣本加至隔片上，400-500g，離心 25min
。

離心后取白色環(huán)狀目的細(xì)胞層
，清洗后重懸備用
。

【注意事項(xiàng)】

1. 全過(guò)程樣本

、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

，

最好在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液存放時(shí)間越長(zhǎng)

，細(xì)胞分離效果越差

。血液放置超過(guò) 6h后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。

本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品
，應(yīng)使用無(wú)靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過(guò)后的玻璃制品
，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁
、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面，影響細(xì)胞分離效果
。

如實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過(guò)低，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助
。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

常溫保存，有效期 2 年

。本品易感染細(xì)菌

，需無(wú)菌條件操作。無(wú)菌條件下操作

，啟

封后置常溫保存

。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶

，影響分離效果

。

【參考值（參考范圍）】

本實(shí)驗(yàn)干細(xì)胞提取率及純度均大于 80%。

下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例

，用戶(hù)可適當(dāng)進(jìn)行參考。

	紅細(xì)胞		白細(xì)胞		血小板

		（4.0-10.0）×10⁹
	（4.0-5.5）×10¹²				（1.0-3.0）×10¹¹
含量（個(gè)/L）	（4.0-5.5）×10¹²	中性粒細(xì)胞	淋巴細(xì)胞	單核細(xì)胞	（1.0-3.0）×10¹¹

		50%-70%	20%-40%	3%-8%

【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】

所獲得干細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)
。

所獲得干細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。

所獲得干細(xì)胞的鑒定方法A.流式細(xì)胞技術(shù)B.免疫組化技術(shù)C.原位雜交技術(shù)

D.PCR 技術(shù)

【可能存在的問(wèn)題及解決方法】

1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問(wèn)題及解決方案如下表所示：


出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案

離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層	轉(zhuǎn)速過(guò)小或離心時(shí)間過(guò)短	適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速

離心后目的細(xì)胞存在于分離液中	轉(zhuǎn)速過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)
離心后目的細(xì)胞存在于分離液中	轉(zhuǎn)速過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

離心后白環(huán)層彌散	細(xì)胞密度過(guò)大	調(diào)整細(xì)胞密度

離心后白環(huán)層太淺或看不見(jiàn)	細(xì)胞密度過(guò)小
離心后白環(huán)層太淺或看不見(jiàn)	細(xì)胞密度過(guò)小

本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心
，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)
。不同地區(qū)客戶(hù)可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整
。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，恒定離心時(shí)間
，對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。