產(chǎn)品類別：外周血白細(xì)胞的分離
 
產(chǎn)品編號(hào)：WBC1110
 
產(chǎn)品名稱：豬外周血白細(xì)胞分離液試劑盒(細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué)專用)
 
產(chǎn)品規(guī)格：200ml/KIT
 
產(chǎn)品價(jià)格：￥650.00元
 
本品用于分離豬外周血白細(xì)胞





“XXXX”動(dòng)物外周血白細(xì)胞分離液實(shí)驗(yàn)方法
 
（細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué)專用）
 
技術(shù)文檔編號(hào)：TBD0031SOP
 
【產(chǎn)品規(guī)格】
 
200ml/Kit
 
【產(chǎn)品組成】
 
為方便廣大用戶使用，試劑內(nèi)容如下：
 

	名稱	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格
A	XXXX 動(dòng)物外周血白細(xì)胞分離液		200ml
B	樣本稀釋液（贈(zèng)品）	2010C1119	200ml
C	清洗液（贈(zèng)品）	2010X1118	200ml
D	紅細(xì)胞裂解液（贈(zèng)品）	NH4CL2009	100ml
E	說明書		1 份

 
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
 
適用儀器：最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
 
【檢驗(yàn)方法】
 
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
 
首先取抗凝血，根據(jù)樣本量大小，分以下兩種情況：
 
情況 A：血液樣本量小于 5ml 時(shí)

，實(shí)驗(yàn)方法如下：
 

• 取一支 15ml 離心管，先加入 5ml 分離液

 

• 用吸管小心吸取血液樣本加于分離液液面上
  ，500-800g
  ，離心 20-30min（注：如改變血液樣本及分離液用量，需相應(yīng)調(diào)整離心力及離心時(shí)間
  ，具體離心條件需客戶自行摸索
  ，以達(dá)到最佳分離效果。）

 

• 離心后用吸管小心吸取所有環(huán)狀乳白色細(xì)胞層（一層或兩層）
  ，加入 10 ml 清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118）
  ，混勻細(xì)胞。250g
  ，離心 10min。重復(fù)洗滌 2-3 次
  ，即得所需白細(xì)胞
  。

 

• 如有紅細(xì)胞殘留請(qǐng)使用紅細(xì)胞裂解液（產(chǎn)品編號(hào)：NH4CL2009）裂解紅細(xì)胞
  ，具體操

 
作方法詳見“紅細(xì)胞裂解液使用說明”。
 
情況 B：血液樣本量大于等于 5ml 時(shí)

，實(shí)驗(yàn)方法如下：
 

• 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管
  ，先加入與樣本等量的分離液。

 

• 將血液樣本小心加于分離液之液面上
  ，550-850g（最大離心力可至 1000g）
  ，離心20-30min。（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件
  ，血液量越多
  ，離心力越大，離心時(shí)間越長
  ，具體離心條件需客戶自行摸索

  ，以達(dá)到最佳分離效果。加入血液樣本后

  ，樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二）

  。

 

• 剩余步驟同“情況 A”中步驟 3 與步驟 4。

 
【注意事項(xiàng)】
 

• 全過程樣本
  、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行

  。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最好在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

  ，血液存放時(shí)間越長

  ，細(xì)胞分離效果越差。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的

  。

 

• 本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品
  ，應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品
  ，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁
  、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面，影響細(xì)胞分離效果
  。

 

• 分離液用量大于稀釋后血液樣本時(shí)
  ，分離效果更佳。

 

• 當(dāng)血液樣本粘度過高需稀釋時(shí)
  ，最優(yōu)稀釋方法：將血液與樣本稀釋液（產(chǎn)品編號(hào)：2010C1119）1:1 稀釋混勻備用
  。注：不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞?huì)降低細(xì)胞得率及活性。如血液樣本經(jīng)過稀釋則分離過程中需適當(dāng)降低離心力和離心時(shí)間
  。

 

• 如實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低
  ，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助。

 
【儲(chǔ)存條件及有效期】
 
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
 
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果