。
 
注：
 

• 無血清培養(yǎng)基中不含任何動(dòng)物成分，為得到更佳培養(yǎng)效果可添加 10%自體血漿或2-8%經(jīng)灝洋篩選的胎牛血清
  。

 

• 完全培養(yǎng)基中含 2-20%胎牛血清（血清具體含量由所培養(yǎng)的目的細(xì)胞而定）
  。

 

• 由于每種細(xì)胞的貼壁時(shí)間存在差異可將所得細(xì)胞分開已達(dá)簡單的純化目的，此法成本相對(duì)較低
  。如需獲得高純度目的細(xì)胞則需在使用分離液后選用免疫磁珠陽性或陰性分選

  。

 
【注意事項(xiàng)】
 

• 全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行
  。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

  ，最好在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液存放時(shí)間越長

  ，細(xì)胞分離效果越差

  。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。

 

• 本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品
  ，應(yīng)使用無靜電

  、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁

  、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面

  ，影響細(xì)胞分離效果。

 

• 吸取過多的目的細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加
  。

 

• 吸取過多的目的細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜
  。

 

• 如所實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助
  。

 
【儲(chǔ)存條件及有效期】
 
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
 
本實(shí)驗(yàn) NK 細(xì)胞提取率大于 80%。
 
 

	下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考 。
		紅細(xì)胞		白細(xì)胞			血小板
			（4.0-10.0）×109
	含量（個(gè)/L）	（4.0-5.5）×1012	中性粒細(xì)胞	淋巴細(xì)胞		單核細(xì)胞	（1.0-3.0）×1011
			50%-70%	20%-40%		3%-8%
	【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】

 

• 所獲得 NK 細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)
  。

 

• 所獲得 NK 細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。

 

• 所獲得 NK 細(xì)胞的鑒定方法A.流式細(xì)胞技術(shù)B.免疫組化技術(shù)C.原位雜交技術(shù)

 
D.PCR 技術(shù)
 
 
【可能存在的問題及解決方法】
 
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：
 

出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案
離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層	轉(zhuǎn)速過小或離心時(shí)間過短	適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速
離心后目的細(xì)胞存在于分離液中	轉(zhuǎn)速過大或離心時(shí)間過長
離心后白環(huán)層彌散	細(xì)胞密度過大	調(diào)整細(xì)胞密度
離心后白環(huán)層太淺或看不見	細(xì)胞密度過小

 

• 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心
  ，其密度與溫度
  、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整

  。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)

  ，恒定離心時(shí)間，對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整

  。

 

• 本分離液依照國際標(biāo)準(zhǔn)
  ，全部使用藥用級(jí)原料，性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同

  ，可

 
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況