產(chǎn)品類別：外周血單核細(xì)胞的分離
 
產(chǎn)品編號(hào)：TBD2011PA
 
產(chǎn)品名稱：熊貓外周血單核細(xì)胞分離液試劑盒
 
產(chǎn)品規(guī)格：2X200ml/Kit
 
產(chǎn)品價(jià)格：￥1100.00元
 
本品用于分離熊貓外周血單核細(xì)胞


 
“XXXX”動(dòng)物外周血單核細(xì)胞分離液實(shí)驗(yàn)方法
 
技術(shù)文檔編號(hào)：TBD0025SOP
 
【產(chǎn)品規(guī)格】
 
2×200ml/Kit
 
【產(chǎn)品組成】
 
為方便廣大用戶使用，試劑內(nèi)容如下：
 

	名稱	產(chǎn)品編號(hào)	規(guī)格
A	分離液 1		200ml
B	分離液 2		200ml
D	清洗液（贈(zèng)品）	2010X1118	200ml
E	說明書		1 份

 
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
 
適用儀器：最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
 
【檢驗(yàn)方法】
 
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
 
方法一（需留取血漿備用）
 

• 首先取抗凝血 250g 離心 10min，棄血漿
  ，補(bǔ)加胎牛血清（添加量與棄去血漿量等同）制成細(xì)胞懸液
  ，根據(jù)細(xì)胞懸液液體體積，選擇適當(dāng)離心管進(jìn)行試驗(yàn)
  。

 

• 取一支離心管
  ，依次小心加入分離液 1、分離液 2（體積比為 3:1
  ，試劑總量與細(xì)胞懸液體積比為 2：1
  。如細(xì)胞懸液為 2ml，則先后加入分離液 1：3ml
  、分離液 2：1ml
  。試劑總量最少不低于 4ml。）
  ，制成梯度界面
  ，各液面分層一定要清晰。

 

• 用吸管小心吸取細(xì)胞懸液加于分離液液面上
  ，400-500g
  ，離心 20-30min（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件
  ，血液樣本量越多
  ，離心力越大，離心時(shí)間越長(zhǎng)
  ，具體離心條件需客戶自行摸索

  ，以達(dá)到最佳分離效果）。

 

• 離心后，此時(shí)離心管中由上至下分為六層
  。第一層為稀釋液層

  。第二層為環(huán)狀乳白色單核細(xì)胞層（第一層白環(huán)及上層 50%分離液 2）。第三層為環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層（下層50%分離液 2 及第二層白環(huán)）

  。第四層為透明分離液 1 液層

  。第五層為粒細(xì)胞層。第六層為紅細(xì)胞層

  。

 

• 用吸管小心吸取第二層到另一 15ml 離心管中
  ，向所得離心管中加入 10ml 清洗液（產(chǎn)品

編號(hào)：2010X1118），混勻細(xì)胞