。
 
【注意事項】
 

• 全過程樣本
  、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結果

  ，最好在取樣 2h 內進行實驗

  ，樣本存放時間越長，細胞分離效果越差

  。樣本放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。

 

• 本實驗最好不使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料制品
  ，應使用無靜電
  、低靜電離心管及未經堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導致細胞貼壁
  、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細胞分離效果
  。

 

• 分離液用量大于骨髓單細胞懸液樣本量時
  ，分離效果更佳。

 

• 如實驗后細胞得率或活性過低
  ，請聯(lián)系技術以尋求支持幫助.

 
【儲存條件及有效期】
 
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
 
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結晶，影響分離效果。
 
【參考值（參考范圍）】
 
本實驗單核細胞提取率大于 80%。
 
下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例，用戶可適當進行參考。
 

		紅細胞			白細胞		血小板
				（4.0-10.0）×109
含量（個/L）		（4.0-5.5）×1012		中性粒細胞	淋巴細胞	單核細胞	（1.0-3.0）×1011
				50%-70%	20%-40%	3%-8%
【相關實驗技術方案】
1.	骨髓沖洗單細胞懸液制備技術 。
2.	所獲得單核細胞的培養(yǎng)技術 。
3.	所獲得單核細胞的核酸提取技術。
4.	所獲得單核細胞的鑒定方法
	A.流式細胞技術
	B.免疫組化技術
	C.原位雜交技術

 
D.PCR 技術
 
 
【可能存在的問題及解決方法】
 
1. 由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：
 

出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案
離心后目的細胞存在于血漿層或稀釋液層	轉速過小或離心時間過短	適當增減轉速
離心后目的細胞存在于分離液中	轉速過大或離心時間過長
離心后白環(huán)層彌散	細胞密度過大	調整細胞密度
離心后白環(huán)層太淺或看不見	細胞密度過小

 

• 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度
  、大氣壓等密切相關

  。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當?shù)厍闆r對離心條件進行適當調整。建議對離心條件進行調整時

  ，恒定離心時間，對離心轉速進行調整

  。

 

• 本分離液依照國際標準
  ，全部使用藥用級原料，性能指標與國產同類產品略有不同
  ，可能出現(xiàn)紅細胞沉降不完全的情況
  ，可以適當加大離心轉速。

 
注：在對離心條件進行調整時，離心轉速的加減以 50-100g 為基數(shù)，直至達到最佳分離效果，
 
離心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準。