。如需獲得高純度目的細(xì)胞則需在使用分離液后選用免疫磁珠陽(yáng)性或陰
 
性分選。
 
【注意事項(xiàng)】
 

• 全過程樣本
  、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行

  。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

  ，最好在取樣 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

  ，樣本存放時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)胞分離效果越差

  。樣本放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的

  。

 

• 本實(shí)驗(yàn)最好不使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電
  、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁

  、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面

  ，影響細(xì)胞分離效果。

 

• 分離液用量大于骨髓單細(xì)胞懸液樣本量時(shí)
  ，分離效果更佳
  。

 

• 如實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低
  ，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)以尋求支持幫助.

 
【儲(chǔ)存條件及有效期】
 
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
 
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
 
【參考值（參考范圍）】
 
本實(shí)驗(yàn)單核細(xì)胞提取率大于 80%。
 
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
 

		紅細(xì)胞			白細(xì)胞		血小板
				（4.0-10.0）×109
含量（個(gè)/L）		（4.0-5.5）×1012		中性粒細(xì)胞	淋巴細(xì)胞	單核細(xì)胞	（1.0-3.0）×1011
				50%-70%	20%-40%	3%-8%
【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】
1.	骨髓沖洗單細(xì)胞懸液制備技術(shù)。
2.	所獲得單核細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù) 。
3.	所獲得單核細(xì)胞的核酸提取技術(shù) 。
4.	所獲得單核細(xì)胞的鑒定方法
	A.流式細(xì)胞技術(shù)
	B.免疫組化技術(shù)
	C.原位雜交技術(shù)

 
D.PCR 技術(shù)
 
 
【可能存在的問題及解決方法】
 
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：
 

出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案
離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層	轉(zhuǎn)速過小或離心時(shí)間過短	適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速
離心后目的細(xì)胞存在于分離液中	轉(zhuǎn)速過大或離心時(shí)間過長(zhǎng)
離心后白環(huán)層彌散	細(xì)胞密度過大	調(diào)整細(xì)胞密度
離心后白環(huán)層太淺或看不見	細(xì)胞密度過小

 

• 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心
  ，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)
  。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整
  。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，恒定離心時(shí)間
  ，對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。

 

• 本分離液依照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)
  ，全部使用藥用級(jí)原料，性能指標(biāo)與國(guó)產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同

  ，可能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況

  ，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。

 
注：在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù)，直至達(dá)到最佳分離效果，
 
離心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。