济公活佛,clothes,野花视频高清完整在线观看}

中文名稱：豬外周血中性粒細胞分離液試劑盒
中文別名：豬外周血中性粒細胞分離液試劑盒

“XXXX”動物外周血中性粒細胞分離液 KIT 說明書

本品用于分離豬外周血中性粒細胞

技術文檔編號：TBD0034SOP

【產品規(guī)格】

200ml/Kit

【產品組成】

為方便廣大用戶使用，試劑內容如下：

	名稱	產品編號	規(guī)格

A	分離液 1		200ml

B	分離液 2		100ml

C	清洗液（贈品）	2010X1118	200ml

D	紅細胞裂解液（贈品）	NH4CL2009	100ml

E	說明書		1 份

【實驗前準備】

適用儀器：最大離心力可達 1200g 的水平轉子離心機

【檢驗方法】

全過程樣本

、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行

。

根據(jù)樣本量大小，分以下兩種情況：

情況 A：血液樣本量小于 5ml 時

，實驗方法如下：

取一支 15ml 離心管
，先加入 4ml 分離液 1，后將 2ml 分離液 2 小心疊加于分離液 1 之上
，形成梯度界面
。

用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，500-650g
，離心 20-30min（注：如改變血液樣本及分離液用量
，需相應調整離心力及離心時間，具體離心條件需客戶自行摸索
，以達到最佳分離效果
。）

離心后，離心管中將出現(xiàn)兩層環(huán)狀乳白色細胞層
，上層細胞為單個核細胞層
，下層細胞為中性粒細胞層。

用吸管小心吸取分離液中的中性粒細胞層
，如有紅細胞混雜則加入適量紅細胞裂解液（產品編號：NH4CL2009）將紅細胞裂解（具體方法見“紅細胞裂解液使用說明”）即得目的細胞
。

將獲得的細胞層移至另一 15ml 離心管中，向所得離心管中加入 10ml 清洗液（產品編號：

2010X1118）

，混勻細胞

。

250g，離心 10min
。

棄上清
。

用吸管以 5ml 清洗液（產品編號：2010X1118）重懸所得細胞。

250g
，離心 10min
。

重復 7、8、9
，棄上清后以 0.5ml 后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞
。

情況 B：血液樣本量大于等于 5ml 時，實驗方法如下：

取一支適當?shù)碾x心管
，依次小心加入分離液 1 及分離液 2（分離液 1 與分離液 2 比例 2：1）,試劑總量與稀釋后的樣本量相等
。

將血液樣本小心加于分離液之液面上，550-750g（最大離心力可至 1000g）
，離心 20-30min
。（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液量越多
，離心力越大
，離心

時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索

，以達到最佳分離效果

。加入血液樣本后，樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二）

。

剩余步驟同“情況 A”中步驟 3 至步驟 10
。

分離圖例

【注意事項】

全過程樣本
、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行
。為獲得最佳的實驗結果，最好在取血 2h 內進行實驗
，血液存放時間越長
，細胞分離效果越差。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的
。

本實驗最好不使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料制品
，應使用無靜電、低靜電離心

管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品

，因為靜電作用將導致細胞貼壁

、堿處理的玻璃表面會

變成毛面，影響細胞分離效果

。

分離液用量大于血液樣本時
，分離效果更佳。

血液樣本不需稀釋
，直接進行分離即可
。

如實驗后細胞得率或活性過低
，請聯(lián)系技術支持以尋求幫助，具體聯(lián)系方式詳見下方生產企業(yè)信息。

【儲存條件及有效期】

常溫保存

，有效期 2 年

。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作

，啟

封后置常溫保存。如 4℃保存

，本分離液易出現(xiàn)白色結晶

，影響分離效果。

【參考值（參考范圍）】

本實驗中性粒細胞提取率大于 80%

。

下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例

，用戶可適當進行參考。

	紅細胞		白細胞		血小板

		（4.0-10.0）×10⁹
含量（個/L）	（4.0-5.5）×10¹²	中性粒細胞	淋巴細胞	單核細胞	（1.0-3.0）×10¹¹
		50%-70%	20%-40%	3%-8%

【相關實驗技術方案】

所獲得中性粒細胞的培養(yǎng)技術
。

所獲得中性粒細胞的核酸提取技術
。

所獲得中性粒細胞的鑒定方法A.流式細胞技術B.免疫組化技術C.原位雜交技術

D.PCR 技術

【可能存在的問題及解決方法】

1. 由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：

出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案

離心后目的細胞存在于血漿層或稀釋液層	轉速過小或離心時間過短	適當增減轉速

離心后目的細胞存在于分離液中	轉速過大或離心時間過長
離心后目的細胞存在于分離液中	轉速過大或離心時間過長

離心后白環(huán)層彌散	細胞密度過大	調整細胞密度


離心后白環(huán)層太淺或看不見	細胞密度過小

本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心
，其密度與溫度
、大氣壓等密切相關。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當?shù)厍闆r對離心條件進行適當調整
。建議對離心條件進行調整時
，恒定離心時間，對離心轉速進行調整
。

本分離液依照國際標準
，全部使用藥用級原料，性能指標與國產同類產品略有不同
，可

能出現(xiàn)紅細胞沉降不完全的情況

，可以適當加大離心轉速。

注：在對離心條件進行調整時

，離心轉速的加減以 50-100g 為基數(shù)

，直至達到最佳分離效果，

離心力最小不得小于 400g

，最大不得大于 1200g

。離心時間以 20-30min 為準。

技術支持：庫價化學(KuuJia)

在線客服

客服01
客服02
客服03
客服04
客服05

微信賬號

別名	豬外周血中性粒細胞分離液試劑盒
英文名