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• 250g
  ，離心 10min
  。

 

• 棄上清。

 

• 用吸管以 5ml 清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細胞
  。

 

• 250g
  ，離心 10min
  。

 

• 重復 8、9
  、10

  ，棄上清后以 0.5ml 后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。

 
分離圖例
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
【注意事項】
 

• 全過程樣本
  、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行

  。為獲得最佳的實驗結果，需在取樣 2h 內(nèi)進行實驗

  。

 

• 本實驗最好不使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料制品
  ，應使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品
  ，因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面
  ，影響細胞分離效果
  。

 

• 分離液用量大于脾臟組織單細胞懸液樣本量時，分離效果更佳
  。

 

• 如實驗后細胞得率或活性過低
  ，請聯(lián)系技術支持以尋求幫助.

 
【儲存條件及有效期】
 
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
 
本實驗中性粒細胞提取率大于 80%。
 

	下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例 ，用戶可適當進行參考 。
		紅細胞		白細胞			血小板
			（4.0-10.0）×109
	含量（個/L）	（4.0-5.5）×1012	中性粒細胞	淋巴細胞		單核細胞	（1.0-3.0）×1011
			50%-70%	20%-40%		3%-8%
	【相關實驗技術方案】

 

• 脾臟組織單細胞懸液制備技術。

 

• 所獲得中性粒細胞的培養(yǎng)技術
  。

 

• 所獲得中性粒細胞的核酸提取技術
  。

 

• 所獲得中性粒細胞的鑒定方法A.流式細胞技術B.免疫組化技術C.原位雜交技術

 
D.PCR 技術
 
【可能存在的問題及解決方法】
 
1. 由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：
 

出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案
離心后目的細胞存在于血漿層或稀釋液層	轉速過小或離心時間過短	適當增減轉速
離心后目的細胞存在于分離液中	轉速過大或離心時間過長
離心后白環(huán)層彌散	細胞密度過大	調整細胞密度
離心后白環(huán)層太淺或看不見	細胞密度過小

 

• 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心
  ，其密度與溫度
  、大氣壓等密切相關。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當?shù)厍闆r對離心條件進行適當調整
  。建議對離心條件進行調整時

  ，恒定離心時間

  ，對離心轉速進行調整。

 

• 本分離液依照國際標準
  ，全部使用藥用級原料

  ，性能指標與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可能出現(xiàn)紅細胞沉降不完全的情況

  ，可以適當加大離心轉速

  。

 
注：在對離心條件進行調整時，離心轉速的加減以 50-100g 為基數(shù)