編號 組分
產(chǎn)品編號/規(guī)格

 
運(yùn)輸與保存方法
 
冰袋（wet ice）運(yùn)輸。本試劑盒中所有組分均在 4℃保存，勿凍存。Annexin V-FITC、PI 需避光保存。一年有效。
 

注意事項

 
1) 由于細(xì)胞凋亡是一個快速的過程，建議樣品在染色后 1 小時之內(nèi)進(jìn)行分析。
2) 對于貼壁細(xì)胞，消化是一個關(guān)鍵步驟。貼壁細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡時如有漂浮細(xì)胞，需收集漂浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞后合并染色。處理貼壁細(xì)胞時要小心操作，盡量避免人為的損傷細(xì)胞。胰酶消化時間過短，細(xì)胞需要用力吹打才能脫落，容易造成細(xì)胞膜的損傷，PI 攝入過多；消化時間過長，細(xì)胞膜同樣易造成損傷，甚至?xí)绊懠?xì)胞膜上磷脂酰絲氨酸與 Annexin V-FITC 的結(jié)合。消化時將胰酶鋪滿孔板底后，輕搖時胰酶與細(xì)胞充分接觸，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段時間，待細(xì)胞間空隙增大，瓶底呈花斑狀即可終止。在消化液中盡量不用 EDTA，EDTA 會影響 Annexin
V 與PS 的結(jié)合。
3) 實驗中如需要固定細(xì)胞，比如在檢測凋亡的同時檢測細(xì)胞周期，只能選用Annexin V-FITC，而不能選用Annexin V-EGFP，因為在固定過程中 EGFP 會變性導(dǎo)致喪失激發(fā)熒光的能力。固定前需要先將細(xì)胞與 Annexin V-FITC 進(jìn)行孵育，并用binding buffer 洗掉未結(jié)合的 Annexin V-FITC。因為固定過程中細(xì)胞通透性增加會產(chǎn)生細(xì)胞碎片，可以和 Annexin V 結(jié)合，對結(jié)果產(chǎn)生干擾。
4) 如果樣品來源于血液，請務(wù)必除去血液中的血小板。因為血小板含有 PS，能與 Annexin  V 結(jié)合，從而干擾實驗結(jié)果?div id="d48novz" class="flower left">