、粗略判定:
用樣本的平均吸光度值與標準液吸光度值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3
,樣本2的吸光度值為1.0
,標準液吸光度值分別是:0ppb為2.243; 0.03ppb為1.816
;0.09ppb為1.415
;0.27ppb為0.74;0.81ppb為0.313
;2.43ppb為0.155
。則樣本1的濃度范圍是0.81ppb~2.43ppb;樣本2的濃度范圍是0.09ppb~0.27ppb
,乘以其對應(yīng)的
稀釋倍數(shù)即為樣本中呋喃它酮代謝物實際濃度
。
2、定量分析
(1)百分吸光率的計算
,標準品或樣本的百分吸光率等于標準品或樣本的吸光度值的平均值(雙孔)除以第一個標準(0標準)的吸光度值
,再乘以100%,即
B—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B
0—0ng/ml標準溶液的平均吸光度值
(2)標準曲線的繪制與計算
以標準品百分吸光率為縱坐標
,以呋喃它酮代謝物標準品濃度(ng/ml)的半對數(shù)為橫坐標
,繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中
,從標準曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度
,乘以其對應(yīng)的
稀釋倍數(shù)即為樣本中呋喃它酮代謝物實際濃度
。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確
、快速分析
。(歡迎來電索取)
八、 注意事項
1
、 室溫低于25℃或試劑及標本未回到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。
2
、 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況
,則會伴隨著標準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象
。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作
。
3、 混合要均勻
,否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象
。
4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸
,避免接觸皮膚
。
5、 不要使用過了有效日期的試劑盒
;稀釋或攙雜使用會引起靈敏度
、OD值變化;不要交換使用不同批號的盒中試劑
。
6
、 不用的微孔板放進自封袋重新密封
;標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感
,因此要避免直接暴露在光線下。
7
、 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)
,應(yīng)當(dāng)棄之。標準品1的吸光度值小于0.5時
,表示試劑可能變質(zhì)
。
8、 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃
,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化
。
九、儲藏條件和保質(zhì)期
1
、 儲藏條件:試劑盒于2~8℃保存
,不要冷凍
。
2、 保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年
,生產(chǎn)日期見包裝盒
。
提示:酶標板真空包裝袋若有漏氣,酶標板仍然正常有效,不影響實驗結(jié)果,請放心使用。
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